脂质磷酸肌醇是细胞各种生命活动的主要调节剂，由磷酸肌醇激酶严格调控产生。目前主要集中在I类磷酸肌醇3-激酶 (PI3K) 的药物治疗上，但近年来已经揭示了靶向几乎所有人类疾病中磷酸肌醇激酶的可能性，包括癌症、免疫缺陷、病毒感染和神经退行性疾病，开发更多磷酸肌醇激酶的强效和选择性抑制剂成为自然趋势。

磷酸肌醇激酶可大致分为三个家族：第一个家族包含所有类别的磷酸肌醇3-激酶（PI3K）和III型PI4K，第二个家族包含PIP激酶，最后一个家族包含II型PI4K（图 1）。 本文将对这三个家族的前沿进展进行详细分析。

I类PI3K抑制剂

磷酸肌醇激酶是多种人类疾病的治疗靶点，包括癌症、病毒感染、神经退行性疾病、发育障碍、糖尿病和炎症性疾病。目前，有许多I类PI3K抑制剂在临床上被批准用于治疗多种癌症。I类磷酸肌醇3激酶(PI3K)产生磷脂酰肌醇3,4,5-三磷酸(PIP3)，是细胞生长、代谢和免疫功能的主要调节剂。PI3K通路是癌症中突变最频繁的通路，PI3K的体细胞突变是多种人类癌症、原发性免疫缺陷、发育障碍和过度生长综合征的致病因素。PI3K 抑制剂的研发将为其他磷酸肌醇激酶抑制剂的设计提供信息。

I 类PI3K以外的磷酸肌醇激酶抑制剂

2.1
PIP激酶演化家族

2.1.1 PIKfyve

● 结构

PIKfyve是真核生物中唯一催化从磷脂酰肌醇3-磷酸(PI3P)生产磷脂酰肌醇3,5-二磷酸(PI(3,5)P2)的蛋白质。除了脂质激酶活性外，PIKfyve还具有蛋白激酶活性，并受抑制性自磷酸化调节。PIKfyve复合体在离子稳态，内吞途径的内体运输、细胞迁移和溶酶体功能中发挥作用。对小鼠突变体和敲除模型以及患者临床突变的研究揭示了PIKfyve复合体所有成员在中枢和周围神经系统中的关键作用。

● 药理抑制剂

PIKfyve抑制剂通过破坏内溶酶体运输来阻断病毒进入宿主细胞质，从而显示出作为抑制病毒感染靶点的前景。能够改善神经退行性疾病，抑制病毒感染和癌症。目前已开发出多种PIKfyve抑制剂。

大部分PIKfyve抑制剂还处于临床前阶段，如YM201636，MF4，APY0201，WX8，NDF和MOMIPP。第一个被发现的强效和选择性PIKfyve抑制剂YM201636源于针对I类PI3K的药物发现，它对PIKfyve非常有效，选择性是I类PI3Kp110α的100倍。PIKfyve抑制剂Apilimod和ESK981正在进行针对癌症和病毒感染的临床试验。PIKfyve抑制剂YM201636和Apilimod都阻断了帕金森病体外模型HEK293细胞中α-突触核蛋白的单体聚集。

2.1.2 PI4P5Ks和PI5P4Ks

● 结构

PI(4,5)P2是哺乳动物细胞中最丰富的双磷酸化磷酸肌醇，而且还是基本癌症和代谢激酶PI3K的底物。负责产生PI(4,5)P2的激酶被分为两个亚家族，即I型和II型激酶。在哺乳动物中，I型PI4P5K家族由三种亚型（PI4P5Kα、PI4P5Kβ和PI4P5Kγ）组成，也存在三种哺乳动物II型PI5P4K亚型（PI5P4Kα、PI5P4Kβ和PI5P4Kγ）。

● PI4P5Ks的药理学抑制剂

迄今为止，已经报道了有限数量的有效和特异性PI4P5K抑制剂，并且仍处于临床前开发的早期阶段，它们被报道抑制癌症和炎症性疾病（表3）。其中最好的是ISA-2011B，它以高亲和力结合PI4P5Kα并在多种模型中抑制其蛋白质表达和癌症生长以及抑制炎症，但它具有显着的脱靶效应，进一步优化ISA-2011B，或开发另一种对PI4P5Kα具有更高选择性的基团，将是推进PI4P5Kα抑制剂超越临床前研究的必要条件。

●PI5P4Ks的药理学抑制剂

PI5P4K已成为p53无效肿瘤中有吸引力的药物靶标，并被认为是代谢的关键调节剂。临床前研究正在探索早期阶段的小分子抑制剂，包括泛PI5P4K抑制剂和亚型特异性PI5P4K抑制剂（表3），它们表现出抑制糖尿病，免疫性疾病，神经退行性疾病和抗癌效果，但目前尚未进入临床阶段。

2.2
PI3K−III型PI4K进化家族

2.2.1 PI4KA和PI4KB

● 结构

有四种哺乳动物磷脂酰肌醇4-激酶(PI4K)，由II型（PI4KIIα和PI4KIIβ）和III型（PI4KIIIα和PI4KIIIβ，）组成，它们一起从磷脂酰肌醇中产生PI4P。PI4P在多种细胞器中介导了蛋白质的膜募集、整合膜蛋白活性的调节和细胞器之间的脂质转运。PI4KA和PI4KB蛋白具有与PI3Ks进化相关的同源螺旋和脂质激酶结构域（图4a、b）。然而，这两种蛋白质通过一组独特的蛋白质结合分子和翻译后修饰具有不同的调节模式。

● PI4KA的药理学抑制剂

PI4KA在HCV感染中的关键作用促进有效和特异性PI4KA抑制剂的开发。PI4KB抑制剂可预防病毒感染，寄生虫感染，PI4KA和PI4KB抑制剂具有抗癌作用。

2.3
II类PI3K

● 结构

II类PI3K，也称为PI3KC2，存在α、β和γ三种亚型。PI3KC2s催化PI和PI4P的3-OH磷酸化；因此，它们似乎既是用于PI3P合成的III类PI3K的替代品，也是I类PI3K和5-OH磷酸酶介导的PI(3,4)P2生产的替代品。

研究最深入的II类亚型是PI3KC2α，它在发育中起着至关重要的作用，PI3KC2α生成的PI(3,4)P2作为内吞作用的关键驱动因素。PI3KC2β中激酶死亡突变的纯合小鼠表现出葡萄糖耐量增强。

● 药理抑制剂

PI3KC2的初始抑制剂是从I类PI3K抑制剂PIK-90的衍生物开发的，得到4-氨基烟酰胺衍生物MIPS-19416，它显示出对PI3KC2α和PI3KC2β的效力。高通量筛选和迭代药物化学优化的结合促成了高选择性PI3KC2α抑制剂(PITCOIN)的开发。PI3KC2α抑制剂能够抗血栓形成，抑制肺癌和黑色素瘤模型的血管生成和肿瘤生长。

2.4
III类PI3K：VPS34

● 结构

III类PI3K，VPS34是真核生物中的原始PI3K酶。它在体外和体内专门催化PI产生PI3P（图1），并且被发现为两种不同的四聚体复合物，即复合物I和复合物II。这两种复合物具有本质上相同的激活机制：通过每个复合物独有的一系列相互作用，将VPS34域从受抑制的构象中释放出来。这两个复合物在功能上是不同的，复合物I启动巨自噬，而复合物II调控内吞途径的流量

● III类PI3K的药理学

二十多年前发现的自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)可抑制VPS34，但选择性极差。最近，已经开发出几种有效且高度选择性的VPS34抑制剂用于临床前研究。最近的临床前研究也表明这些化合物可有效治疗癌症。

展望

许多磷酸肌醇激酶与各种血液学、神经学和传染病以及各种癌症有关。它们已被证明适合小分子抑制剂的开发，预示着作为真正治疗靶点的巨大潜力。已经为大多数PI3K超家族以及PIKfyve开发了高效和选择性抑制剂；这些都处于高级临床前研究阶段，甚至进入临床试验阶段，针对PI4P5Ks和PI5P4Ks以及II型PI4Ks也开发了有前景的工具化合物。

参考资料：
1. Burke, J.E., Triscott, J., Emerling, B.M. et al. Beyond PI3Ks: targeting phosphoinositide kinases in disease. Nat Rev Drug Discov (2022). https://doi.org/10.1038/s41573-022-00582-5
2. 智慧芽数据库https://synapse.zhihuiya.com/
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