迄今为止，美国FDA已经批准了6款CAR-T疗法上市，CAR-T疗法在治疗血液癌症方面也显示出了优异而持久的疗效，甚至让部分患者看到了治愈的希望。不过，CAR-T疗法以及其它细胞疗法的广泛使用仍然面对着疗效持久性、安全性、制造流程方面的多重瓶颈。在今年的美国血液学会（ASH）年会上，多家公司报告了克服这些瓶颈的创新技术进展。

逃脱免疫系统攻击，Sana公布“现货型”CAR-T疗法最新结果

利用健康供体提供的T细胞制造同种异体CAR-T细胞疗法是提高CAR-T疗法产量，加快患者接受治疗速度的策略之一。不过同种异体CAR-T细胞会被患者的免疫系统识别为外来物，最终被清除出患者体内，导致疗效的持久性下降。Sana Biotechnology公司正在开发的低免疫同种异体CAR-T细胞旨在通过对从健康供体中获得的T细胞进行改造，增强其免疫逃逸特性，并且降低移植物抗宿主病发生的可能。

在ASH年会上，该公司汇报的临床前数据显示，使用Cas12b可以对同种异体CAR-T细胞进行多重基因编辑改造，有效扰乱B2M、CIITA和TRAC的表达，避免CAR-T细胞被免疫系统识别并减少移植物抗宿主病的产生。同时在这些细胞上过表达CD47可以避免CAR-T细胞被先天免疫系统识别。在动物模型中，经过改造的BCMA靶向CAR-T细胞能够避免先天和适应性免疫系统的识别，并且表现出强力抗癌活性。

两天内完成CAR-T疗法制造，诺华细胞疗法完全缓解率超过60%

限制CAR-T疗法应用的关键瓶颈之一是自体疗法制造的时间比较长，导致疾病进展迅速的患者可能还未等到疗法制备完成就出现疾病恶化，失去接受治疗的机会。诺华公司的创新T-Charge技术平台使用了一种快速的CAR-T细胞生产流程，可以在2天内完成CAR-T细胞生产并且保存T细胞的干细胞特征。

在ASH年会上发布的最新临床试验结果显示，利用这一平台制造的在研疗法rapcabtagene autoleucel在治疗复发/难治性弥漫性大B细胞淋巴瘤患者时，接受剂量为12.5X10^6个CAR-T细胞治疗的患者中，完全缓解率在3个月时为63%，在6个月时为69%。中位缓解持续时间尚未达到。不过汇报结果的研究人员同时指出，虽然T-Charge技术可以加快CAR-T细胞的生产步骤，但是对CAR-T细胞的质量检测，清除患者体内的淋巴细胞等步骤仍然需要花费时间。因此，目前T-Charge技术没有显著减少从患者体内获取T细胞到将CAR-T细胞输注回患者体内之间的时间（vein-to-vein time）。

增强抗癌效果同时避免伤及健康细胞，“智能”CAR-NK疗法即将进入临床

表达嵌合抗原受体（CAR）的细胞目前靶点有限，原因之一是很多在癌细胞表面表达的蛋白在健康细胞中也表达，导致靶向这些抗原的CAR同时会伤及健康细胞。而且癌细胞有时候会通过丢失表面的抗原表达，逃避CAR的识别。

Senti Bio公司开发的细胞疗法通过给细胞加上逻辑回路，让细胞更为“智能”地区分癌细胞和健康细胞。该公司开发的SENTI-202是一款新一代CAR-NK细胞疗法。它携带了两种不同的逻辑回路，“OR”回路让它能够识别癌细胞表面表达的CD33或FLT3抗原，从而具有更高的抗癌潜力。而“NOT”回路在识别造血干细胞表面表达的EMCN抗原时会抑制疗法的活性，从而避免SENTI-202杀伤健康造血干细胞。这款CAR-NK疗法还表达可控释放的IL-15蛋白，进一步增强NK细胞的活性。在临床前研究中，它已经表现出良好的抗癌活性和显著降低的肿瘤外毒性。这款在研疗法预计在2023年下半年递交IND申请。

利用iPSC生产细胞疗法，Fate Therapeutics公司公布最新试验结果

Fate Therapeutics公司在ASH年会上公布了其基于诱导多能干细胞（iPSC）平台生产的CAR-NK细胞FT576的最新临床试验结果。该公司基于iPSC的生产平台可以将经过基因工程改造的iPSC储存起来，在需要的时候扩增分化成为T细胞或者NK细胞，为生产“现货型”细胞疗法提供几乎无限的细胞来源。

该公司开发的FT576是一款表达靶向BCMA的CAR的NK细胞。它同时表达具有高亲和力的不可切割CD16 Fc受体，最大化抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC），同时允许NK细胞与单克隆抗体疗法联用靶向不同抗原。1期临床试验结果显示，接受单剂FT576治疗（剂量为3亿个细胞）的3名复发/难治性多发性骨髓瘤患者中，一名患者获得非常好的部分缓解，两名患者疾病稳定。在接受单剂FT576（剂量为1亿个细胞）和抗体疗法daratumumab联合治疗的3名患者中，一名患者获得部分缓解，一名患者获得轻微缓解（minor response）。

期待这些新技术不断进步，扩展CAR-T细胞和其它基因工程改造的细胞疗法的疗效、安全性，和应用范围。

参考资料：
[1] Novartis develops CAR-T therapy that can be made in a fraction of the standard time. Retrieved December 12, 2022, from https://www.statnews.com/2022/12/11/cart-therapy-novartis-rapid-manufacturing/
[2] Sana Biotechnology Highlights Hypoimmune Allogeneic CAR T Cell Programs and in vivo Technology Platform with Six Presentations at 2022 ASH Annual Meeting. Retrieved December 12, 2022, from https://ir.sana.com/news-releases/news-release-details/sana-biotechnology-highlights-hypoimmune-allogeneic-car-t-cell
[3] Fate Therapeutics Highlights iPSC-derived, Off-the-shelf CAR NK Cell Programs for Multiple Myeloma at 2022 ASH Annual Meeting. Retrieved December 12, 2022, from https://ir.fatetherapeutics.com/news-releases/news-release-details/fate-therapeutics-highlights-ipsc-derived-shelf-car-nk-cell
[4] Senti Bio Highlights Preclinical Data from Logic-Gated Gene Circuit CAR-NK Cell Therapy SENTI-202 at ASH Annual Meeting and Investor Event. Retrieved December 12, 2022, from https://investors.sentibio.com/news-releases/news-release-details/senti-bio-highlights-preclinical-data-logic-gated-gene-circuit
[5] YTB323 (Rapcabtagene Autoleucel) Demonstrates Durable Efficacy and a Manageable Safety Profile in Patients with Relapsed/Refractory Diffuse Large B-Cell Lymphoma: Phase I Study Update. Retrieved December 12, 2022, from https://ash.confex.com/ash/2022/webprogram/Paper162520.html
[6] BCMA-Targeted, Hypoimmune Allogeneic CAR T Cells Exhibit Potent Anti-Tumor Activity Together with the Ability to Evade Innate and Adaptive Immune Rejection in Pre-Clinical Tumor Models. Retrieved December 12, 2022, from https://ashpublications.org/blood/article/140/Supplement%201/7120/489733/BCMA-Targeted-Hypoimmune-Allogeneic-CAR-T-Cells