4月15日，辉大基因宣布，美国FDA授予该公司的迷你型dCas13X-RNA碱基编辑器（mxABE）疗法儿科罕见病药物资格（RPDD），用于治疗OTOF（otoferlin）基因中Q829X突变相关的儿童听力损失。这是辉大基因继2024年2月29日获得孤儿药（ODD）认定后FDA再次认可其潜在临床价值，成为首个获得ODD和RPDD双认定的Cas13X-RNA碱基编辑器疗法。

2023年发表在Cell-Molecular Therapy杂志的临床前研究数据显示，辉大基因研发的迷你型dCas13X-RNA碱基编辑器疗法有潜力为因OTOF基因中Q829X突变而患有严重听力损失的儿童恢复听力。

在本项研究中，研究人员引入了一种通过AAV9变体传递的增强型迷你型dCas13X的小型化RNA碱基编辑器——emxABE。由于emxABE小型化的特点，克服了AAV病毒载体递送尺寸的限制，只需单个AAV载体即可递送。此外，与基于CRISPR-Cas9的基因编辑相比，emxABE不会对基因组DNA造成永久性改变，而是对mRNA进行精准的单碱基改变，具有更高的安全性。

在人源化OtofQ829X/Q829X小鼠出生后0-3天期间通过耳蜗内蜗管注射AAV-emxABE，观察到近乎100%的内耳毛细胞中恢复了OTOF的表达。此外，它们的听觉功能显著改善，达到与野生型小鼠相似的水平，这种听觉功能至少持续了7个月，显示出该疗法具有长期效果。该研究还对出生后5-7天和30天的小鼠进行了治疗，通过内耳圆窗膜注射注射AAV-emxABE，同样有效恢复了听觉功能。

先天性耳聋关键基因：OTOF

听力损伤是最常见的先天性缺陷，每1000名新生儿中就有1~2名先天性耳聋患儿，其中60%是由基因缺陷导致的。到目前为止，还没有有效的药物能够治疗先天性耳聋。当前的主要方法是植入人工耳蜗。但人工耳蜗存在诸多不足，例如在嘈杂的环境中对语音接受理解受限，且音乐感知能力差。

OTOF基因编码otoferlin蛋白，主要表达在内毛细胞，是内毛细胞突触传递过程中的关键蛋白。约2~8%的先天性非综合征型听力损伤是由OTOF基因突变引起。OTOF基因突变也是听神经谱系障碍的主要原因。全世界大约有16万人受OTOF基因缺陷影响，在中国预计有3万名OTOF耳聋患者，每年预计新增400名新患者。

OTOF是最早被发现的耳聋基因，有研究表明OTOF突变患者内毛细胞发育未受影响，内毛细胞形态正常。对于这样的患者，基因治疗有希望带来比人工耳蜗更好的治疗效果。

双AAV基因疗法研发如火如荼

近年来，基因疗法成功治疗了多种人类但基因遗传疾病。对于OTOF基因突变导致的耳聋，除了碱基编辑器疗法，另一种常见的基因治疗策略是使用腺相关病毒（AAV）将正确版本的OTOF基因的DNA递送到内耳毛细胞，替代突变基因，进而恢复听力，也就是基因过表达策略。为了解决OTOF基因过大而超过单个AAV载体载荷的问题，目前候选药物均采用AAV双载体，旨在将OTOF cDNA分段包装于两个AAV载体。目前全球有3款AAV双载体在研疗法包括再生元（Regeneron Pharmaceuticals）收购Decibel Therapeutics公司时所获得的DB-OTO、礼来（Eli Lilly and Company）收购Akouos公司获得的AK-OTOF和Sensorion的 SENS-501，目前也都处于早期临床阶段。其中，DB-OTO的临床进展更快。前不久，再生元公布了DB-OTO治疗首例患者的临床试验结果，1名不到2岁的患者在接受治疗后的第6周观察到了听觉反应有改善。

AK-OTOF的设计原理也是利用两种AAV携带OTOF基因的不同片段，表达时通过基因片段的自修复，在细胞内完成全长OTOF基因的表达。礼来在2022年10月以12.50美元/股的价格收购了Akouos，加码基因疗法。目前，该疗法处于1/2期临床试验阶段。今年1 月 23 日， Akouos 宣布了 1/2 期 AK-OTOF-101 研究的初步临床结果。该研究表明第一位参与者（一位 11 岁的男孩）在服用 AK-OTOF 后，30 天内观察到听力恢复，该男孩自出生起就听力丧失。

Sensorion也开发了一款治疗Otoferlin基因介导的听力损失的双载体AAV基因疗法SENS-501。今年1月，Sensorion宣布其基因疗法SENS-501在欧洲提交的临床试验申请（CTA）已经被批准，将率先在法国启动1/2期临床试验，旨在评估SENS-501在6-31个月患儿中的安全性、耐受性和有效性。未来，该疗法可能会在意大利、德国等国家开展临床试验。

国内方面，鼎新基因和星奥维妥走在前列。鼎新基因是国内率先采用AAV双载体递送技术的基因治疗公司，其与复旦大学附属眼耳鼻喉科医院合作推进的RRG-003是一款靶向OTOF基因的双AAV内耳基因疗法，采用了基因补偿的方式，通过局部微创给药将RRG-003递送到耳蜗内，补偿缺陷的耳畸蛋白。在2023年第30届欧洲基因与细胞治疗学会（ESGCT）年会上，RRG-003的IIT研究结果显示,首批接受治疗的患者中有4例患者在治疗后得到了明显的听力改善，已可以日常对话，并且耐受性和安全性良好。

星奥拓维已经搭建了AAV递送系统智能开发平台、跨物种内耳基因治疗实验平台、高通量类器官与再生筛选平台、基因编辑平台和超容量基因递送平台，正开发AAV的双载体、三载体系统。其已经布局了超过5条产品管线，进展最快的是用于治疗OTOF基因突变引起的感音神经性耳聋的AAV基因疗法OTOV-101，其IIT研究已经初步展现出良好的疗效和安全性。

结语

虽然目前国内针对耳聋的基因疗法才刚刚迈入临床，但是已经在该领域积累了不错的科研成果，并且已经开始向临床转化。从国内外研究与应用的方向，我们大体可以总结出，在耳聋领域的基因疗法未来将围绕载体和基因编辑工具不断进行优化，或通过基因导入、基因修复、毛细胞再生等途径实现治疗，甚至mRNA疗法、细胞疗法也会诞生。先天性耳聋是医学界最大的未满足需求的领域之一，影响着全世界数以万计的儿童，相信未来必将有更多企业投身于此。

参考来源

1. 企业官网

2. Jiang L, Wang D, He Y, Shu Y. Advances in gene therapy hold promise for treating hereditary hearing loss. Mol Ther. 2023 Apr 5;31(4):934-950. doi: 10.1016/j.ymthe.2023.02.001. Epub 2023 Feb 8. PMID: 36755494; PMCID: PMC10124073.

3. Yuanyuan Xue.(2023)RNA base editing therapy cures hearing loss induced by OTOF gene mutation. Molecular Therapy.DOI:https://doi.org/10.1016/j.ymthe.2023.10.019

4. Jun Lv et al., (2024). AAV1-hOTOF gene therapy for autosomal recessive deafness 9: a single-arm trial. The Lancet, https://doi.org/10.1016/S0140-6736(23)02874-X