美国 FDA 药品审评与研究中心（CDER）全球合规高级政策顾问 Brooke Higgins 日前在 ISPE 2023 无菌大会上概述了在无菌工厂检查中的一些常见问题，以及检查趋势。

Higgins 重点关注在培养基灌装、无菌检查和环境监测中出现的问题。她表示，“无菌工艺伴随着高风险”，为确保最终产品的无菌性，需要考虑许多变量，包括洁净间的设计、消毒程序和实践、培养基灌装程序以及对偏差和环境控制趋势的响应。

根本原因调查不力

Higgins 详细讲述了在因产品小瓶污染导致培养基灌装多次失败后发给一家公司的警告信，公司未能找到产品污染的根本原因。

这些培养基灌装失败涉及在产品培育过程中发现的大量浑浊小瓶。调查发现，污染是由于心轴冷却水中存在铜绿假单胞菌或革兰氏阴性杆菌引起的，心轴是用于生产无菌药品的吹/灌/封（BFS）设备中使用的软管。Higgins 表示，在无菌操作和培养基灌装中，革兰氏阴性杆菌的存在应该“非常罕见”。

公司通过修复心轴中的漏水并清洁 BFS 斗的外表面作为回复，然后继续执行单次培养基灌装以重新验证生产线。

Higgins 表示，“单次培养基灌装不足以完成重新认证”，相反，公司需要执行全面的纠正预防措施（CAPA），然后连续运行 3 次才能重新验证该生产线。“高致病性微生物的存在会导致高风险突变，对患者来说可能是致命的，需要得到紧急有效的补救。”

随后的根本原因调查得出结论，污染源于某些 BFS 机械的设计缺陷，而不是漏水。

培养基灌装失败补救

另一个问题是公司未能对失败的培养基灌装进行任何类型的补救。在一个案例中，一家公司“有许多浑浊的小瓶”但没有进行调查。所涉药物是在无菌灌装柜中生产的。

Higgins 表示，“想象一下培养基灌装失败，可能有一半的小瓶浑浊，而且没有采取任何纠正措施。即使无法查明确切的根本原因，也必须确定需要改进的地方。如果没有，就无法保证可以防止不合格再次发生。”

无菌检查调查不力

另一趋势是对失败的无菌检查结果的调查不力。在一个案例中，一家公司决定，在未鉴别出微生物的情况下，阳性无菌检查是由于进行测试的微生物分析员生病而导致的结果，未能进行更全面的调查。

一名健康的分析员随后进行了测试，批次通过，因此公司宣布不合格的无菌结果无效并放行了该批次。然而这种微生物从未被鉴别出来。

环境监测计划不足

一些企业没有对无菌加工区域进行充分的环境监测。在一个涉及到在限制进入隔离系统（RABS）中进行无菌灌装的案例中，公司在无菌处理间隔离了数千种微生物，但很少鉴别这些微生物。有一年，企业在 ISO 7 区域发现了一种微生物，而该微生物是通过使用企业的照片库确定的。

Higgins 询问在场与会者，是否可以根据目检将微生物鉴别到物种级别，在场没有人举手。

RABS 和隔离器

Higgins 最后敦促制药商采用封闭式隔离系统，例如隔离器和 RABS，以消除洁净间中的人为干预，并指出洁净间中人的存在是主要污染源。她补充表示，“希望看到继续推动改进和增加操作人员与灌装线的分离，甚至完全去除无菌药物生产人员。这将大大降低污染的风险。”