2021年6月26日，NEJM杂志发表了一篇题为：CRISPR-Cas9 In Vivo Gene Editing for Transthyretin Amyloidosis 的论文，公布了诺奖得主Jennifer Doudna创立的Intellia Therapeutics和再生元合作开发治疗转甲状腺素蛋白淀粉样变性（ATTR）的CRISPR基因编辑疗法NTLA-2001I期临床结果（NCT04601051）。据悉，这也是首个公布的体内CRISPR基因编辑疗法的临床试验结果。

6例接受治疗的患者中，3例接受0.1 mg/kg剂量，3例接受0.3 mg/kg剂量。接受治疗28天后，两种不同剂量的患者血浆种TTR蛋白水平分别平均下降52%和87%，且未观察到严重不良反应。

3月1日，Intellia 和再生元公布了NTLA-2001的最新I期临床试验数据，显示NTLA-2001可以快速、深度、持久地减少患者血清中TTR蛋白的水平。具体来说，共9例患者接受了一次性输注。在第28天，低剂量组（0.7 mg/kg）患者转甲状腺素（TTR）水平平均下降86%、高剂量组（1.0 mg/kg）患者平均下降93%。结合之前的试验数据，在所有4个剂量水平上都观察到TTR剂量依赖性降低。安全性方面，加上去年公布的6例患者共15例患者接受该疗法后几乎没有严重副反应。


NTLA-2001用于遗传性ATTR淀粉样变性伴多发性神经病（ATTRv-PN）首次人体I期研究分两部分 。（来源：Intellia）

此外，在随访2至12个月的患者中能观察到持续的血清TTR降低。去年公布的高剂量组在至少半年时间里维持了疗效，但低剂量组一年后疗效下降，TTR水平从治疗一个月后的低于基线52%上升到41%。Intellia首席执行官John Leonard将其归咎于他们用来评估蛋白表达的检测：“编辑的细胞越少，数据就越不准确。”

在随访期间观察到血清TTR持续降低。（来源：Intellia）

转甲状腺素蛋白淀粉样变性（也称为ATTR淀粉样变性）是一种不断进展的致死性疾病，其特征是由错误折叠的TTR蛋白组成的淀粉样原纤维在组织内累积，可分为野生型ATTR淀粉样变性和遗传性ATTR（hATTR）淀粉样变性。目前全球的遗传性ATTR淀粉样变性患者人数约为5万人，临床表型以淀粉样多发性神经病或淀粉样变心肌病为主，大多数患者同时有上述两种表型。症状出现后，ATTR淀粉样变性不断进展，最终结果是淀粉样变心肌病患者在确诊后2～6年（中位数）死亡，无心肌病的淀粉样多发性神经病患者在症状出现后4～17年死亡。

ATTR淀粉样变性当前的治疗策略是通过稳定四聚体形式的TTR（采用默沙东的二氟尼柳或辉瑞的氯苯唑酸）或者通过抑制TTR蛋白质合成（采用Ionis的inotersen或Alnylam的patisiran，以降解TTR mRNA的方式）来减少淀粉样蛋白的持续形成。这些疗法可缓解症状、改善功能并延长生存期，但局限性是需要长期用药才能维持TTR的敲落，并且有严重副作用，接受TTR稳定剂的患者会出现疾病进展。

NTLA-2001 疗法是一种基于CRISPR-Cas9的新型体内基因编辑疗法，由专利脂质纳米颗粒（LNP）递送系统和人密码子优化的化脓性链球菌Cas9蛋白mRNA序列组成。该递送系统具有向肝性，并且携带靶向人TTR的单向导RNA（sgRNA）。

来源：Intellia

NTLA-2001通过静脉输注给药，旨在编辑肝细胞内的TTR，从而在单次给药后使野生型和突变型TTR的生成均减少。


NTLA-2001的作用机制。A）NTLA-2001的主要成分；B）NTLA-2001 LNP转运到肝内的肝窦毛细血管；C）Cas9核糖核蛋白复合物通过入核转运的方式进入细胞核，并在细胞核内识别TTR中非互补DNA链上的前间隔序列邻近基序（PAM）。（来源：NEJM）

尽管NTLA-2001似乎可以“一针永逸”，但这也意味着出现毒副作用更难逆转。例如，人体可能需要ATTR中的关键蛋白TTR来实现关键功能，将其敲除可能会带来意想不到的后果。服用patisiran的患者可以停止服用，但接受CRISPR治疗的患者难回头。

不过新的数据还是给Intellia带来了信心，让他们可以直接在患者身上进行其他试验。目前，一项敲除导致遗传性血管性水肿基因的新试验正在进行。该公司还公布了对血友病等其他罕见疾病进行更复杂治疗的计划。

Intellia预计将于2022年完成ATTR-PN和ATTR淀粉样变性心肌病（ATTR-CM）项目的I期研究招募，并在今年晚些时候公布更多数据。Intellia和Regeneron计划对这两种类型的ATTR淀粉样变进行关键性研究，最初的重点是该疾病的心肌病表现。

值得一提的是，尽管该公司在临床上取得了进展，但其近期面临着一个潜在的商业挫折。2月28日，加州大学伯克利分校就CRISPR用于医药研究的专利权输给了Broad研究所。美国专利商标局裁定：张锋所在的博德研究所团队拥有在真核细胞中使用CRISPR基因编辑工具的专利，而2020年诺奖得主Jennifer Doudna和Emmanuelle Charpentier所在的团队CVC（加州大学、维也纳大学和Charpentier三个主体的首字母缩写）则失去了该技术在最为关键应用领域的专利优先权。Intellia已经获得了加州大学伯克利分校的技术许可，现在需要与隶属于麻省理工学院和哈佛大学的Broad研究所进行专利谈判。

参考资料：
1# Julian D. Gillmore，et al. CRISPR-Cas9 In Vivo Gene Editing for Transthyretin Amyloidosis. NEJM.2021
2# Intellia and Regeneron Announce Updated Phase 1 Data Demonstrating a Single Dose of NTLA-2001, anInvestigational CRISPR Therapy for Transthyretin (ATTR) Amyloidosis, Resulted in Rapid, Deep and Sustained Reduction in Disease-Causing Protein.（来源：Intellia官网）
3# Expanded Intellia CRISPR data set up showdown with Pfizer, Ionis and Alnylam in not-so-rare disease.（来源：Endpoints News）
4# NTLA-2001 for ATTR Amyloidosis: Interim Clinical Results from Ongoing Phase 1 Trial（来源：Intellia，2022/2/28）